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高效液相色譜儀配示差檢測器測定蜂蜜糖類的方法

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高效液相色譜儀配示差檢測器測定蜂蜜糖類的方法

     高效液相色譜儀配示差檢測器測定蜂蜜糖類的方法是深圳市億鑫儀器設備有限公司提供。詳細方法如下:

一、原理:試樣用水溶解,乙睛定容后,經0.45um濾膜過濾,高效液相色譜儀配示差折光檢測器測定,外標法定量

二、 試劑和材料

1、乙腈:色譜純。

2、水:GB/T 6682規定的一級水。

3、 果搪、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖標準物質:純度≥99% .

4、果糖、葡萄糖標準儲備溶液:準確稱取5g果糖標準物質和4g葡萄糖標準物質,精確至0.0001g,放人同一100mL 容量瓶中,加人60mL水溶解,用乙臘定容至體積,搖勻。

5、 蔗糖、麥芽糖標準儲備溶液:分別稱取2g蔗糖和2g麥芽糖標準物質,精確至0.0001g,放入同一100mL 容量瓶中,加人60mL水溶解,用乙臘定容至體積,搖勻。

6、 果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖標準工作溶液:吸取不同體積的果糖、葡萄糖標準儲備溶液和蔗糖、麥芽糖標準儲備溶液,用乙睛十水( (40+ 60)稀釋至體積,配成不同濃度的果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖標準工作溶液,用于繪制標準工作曲線。

三、儀器

高效液相色譜儀:配有示差折光檢測器。

分析天平:感量0.1mg和0.001g各一臺。

注射器:10ml。

有機相過濾膜:0.45um

樣品瓶:1.5ml。

容量瓶:10ml , ,25ml ,50ml 100ml

四、 試樣制備與保存

1、試樣的制備:對無結晶的實驗室樣品,將其攪拌均勻。對有結晶的樣品,在密閉情況下,置于不超過 60℃的水浴中溫熱,振蕩,待樣品全部融化后攪勻,冷卻至室溫。分出0.5kg作為試樣。制備好的試樣置于樣品瓶中,密封,并做上標記。

2、 試樣的保存:將試樣于常溫下保存。

五、 測定步驟

1、提取:稱取5g試樣,精確至0.001g。置于100ml燒杯中,加人30mL水,用玻璃棒攪拌使試樣完全溶解,轉移至100ml容量瓶中,然后再用10mL水洗燒杯三次并轉移至上述100ml容量瓶中,用乙睛定容至體積,混勻。用0.45um濾膜將樣液過濾人樣品瓶中供高效液相色譜儀測定。

2、液相色譜條件:

a) 色譜柱:碳水化合物分析柱 10um ,  300mm X 3.9mm (i.  d);

b) 流動相:乙睛+ 水( (77+ 23);

c) 流速:1.0ml/min ;

d) 柱溫 ;25℃;

e) 檢測器池溫度:35℃ ;

f) 進樣量,15uL ,

3、液相色譜測定:用配制的果搪、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖標準工作溶液繪制以峰高為縱坐標,工作溶液濃度為橫坐標的標準工作曲線,保證樣品溶液中果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖的響應值均應在標準工作曲線的線性范圍內,樣品溶液與標準工作溶液等體積進樣進行高效液相色譜儀測定。在上述色譜條件下,果糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖的分離度應大于 1.5。



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