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對蛋白同化制劑及其他禁用物質檢測分析

發布:賽默飛世爾科技(中國)有限公司
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【概述】

    “蛋白同化制劑”又稱同化激素,俗稱合成類固醇(anabolicsteroids,AS),是合成代謝類藥物,具有促進蛋白質合成和減少氨基酸分解的特征,可促進肌肉增生,提高動作力度和增強男性的性特征。但如果出于非醫療目的而使用(濫用)此類藥物則會導致生理、心理的不良后果,因此世界反興奮劑機構(WADA)把AS列入禁用物質名單。然而,興奮劑AS檢測難度很大,不僅要定量AS的濃度,還要盡可能多的篩出這些禁用物質,而涵蓋的禁用物質結構各異,化學性質差異較大,濃度線性范圍也寬,使得分析更加困難。

      TSQ 8000 Evo具備專利的快速碰撞池技術,結合Timed-SRM掃描方式,可在35min內實現5496個離子對的同時采集分析,高達七個數量級的寬線形范圍為離子檢測系統,而方法學指標基本不受影響。TraceFinder工作站具有非常強大的QAQC功能,通過對保留時間、定量/性離子對及離子對比率等關鍵定性指標及相關輔助定量指標設置閾值,貼心的Flag功能通過不同顏色直觀的顯示是否符合要求。由此,分析人員可從大量組分或者大量樣品中,快速篩查出可疑的陽性組分或者陽性樣品。

【實驗/設備條件】

image.png

部分SRM離子對信息如下:

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【實驗/操作方法】

本文利用TSQ 8000 Evo三重四極桿氣質聯用儀,結合TraceFinder工作站,建立了高通量篩查分析的一般工作流程。

【實驗結果/結論】

1.方法建立

      賽默飛擁有共計124個藥物及其代謝物SRM參數數據庫,每種化合物均包括保留時間、離子對及碰撞能等信息。只需從數據庫中挑選要做的組分,直接導入到采集方法中,即可完成方法建立。當然,如果數據庫中全部化合物都導入到方法里,則可實現該范圍內的篩查分析。Timed-SRM掃描功能可大大提高保留時間漂移的容忍度。

圖1.賽默飛124種化合物的數據庫.png

圖1.賽默飛124種化合物的數據庫


2.篩查閾值設置

      多組分篩查分析時,一般是依據化合物保留時間、定量/性離子對、離子對比率進行判斷是否檢出。TraceFinder工作站可以對其進行設置,如下:

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圖2.相關篩查閾值設置.png

圖2.相關篩查閾值設置


     關于離子對比率計算方法,軟件提供了manual、average、weighted average及level四種計算方式,可根據實際情況進行選擇。關于離子對比率允差設置,軟件提供了relativeabsolute兩種計算方式及允差范圍設置,可根據實際情況進行選擇。

任何一項超出設置范圍,TraceFinder工作站會通過相應的Flag顯示。詳見2、4部分。

3.QAQC閾值設置

      在定量分析中,可以選擇性的設置一些閾值,使軟件按照閾值自動判斷諸如標準曲線、定量結果等數據的質量,從而節省時間和精力。任何一項超出設置范圍,TraceFinder工作站會通過相應的Flag顯示。詳見4部分。

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圖3.部分QAQC功能

4.Flag設置

       2、3部分簡單的介紹了在篩查分析及日常定量分析中,TraceFinder工作站能夠給分析人員提供的一些必要判斷標準的選擇。TraceFinder工作站允許分析人員根據實際需要對這些閾值規則進行修改并選擇不同形式的Flag顯示。具體設置界面如圖4。

      本文中,為了描述方便,僅對confirming ions coelution、Ion ratio failure、NF(peak not found)等設定了相應的Flag。軟件會自動幫分析人員快速的進行判斷篩選,最終通過Flag形式顯示出來。由圖 7 的一系列圖可以直觀的看出,有 29 種組分未檢出,95 種組分確認檢出。

       當目標組分數目少于樣品數目時,采用Compound View功能查看,可以快速的進行不同樣品間比較。見圖8。也可以同時結合色譜峰進行比較查看,見圖9。

圖4. Flag設置界面.png

圖4. Flag設置界面

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圖7. Flag顯示結果

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圖8. Compound View功能

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圖9.色譜峰視圖

結論

通過介紹TraceFinder工作站的強大功能,建立了快速篩利用功能強大的TraceFinder工作站,結合TSQ 8000 Evo出色的性能,可顯著提高篩查及高通量分析的效率。TSQ8000 Evo能夠在保證良好的方法學指標基礎上,29.5 min內完成數據庫里所有化合物的同時分析。在此基礎上,TraceFinder工作站可以預先設置相關的閾值,通過Flag功能直觀顯示出來,輔助分析人員快速的進行篩選判斷。

【儀器/耗材清單】

TSQ 8000 Evo三重四極桿氣質聯用儀、TraceFinder工作站

2019-04-11 15:46:44
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